Mga produkto

Mahigit sa 70% ng mga low-grade gliomas ang nagdadala ng heterozygous R132H mutation sa gene coding para sa isocitrate dehydrogenase 1 (IDH1).Ibinibigay nito ang enzyme na may kakayahang nobela na i-convert ang α-ketoglutarate sa 2-hydroxyglutarate, na sa huli ay humahantong sa tumorigenesis.Ang pangunahing pinagmumulan ng produksyon ng 2-hydroxyglutarate ay glutamine, na, sa kanser, ay pinagmumulan din ng tricarboxylic acid cycle (TCA) anaplerosis.Ang isang alternatibong pinagmumulan ng anaplerosis ay pyruvate flux sa pamamagitan ng pyruvate carboxylase (PC), na isang karaniwang pathway sa mga normal na astrocytes.Ang layunin ng pag-aaral na ito ay upang matukoy kung ang PC ay nagsisilbing source ng TCA anaplerosis sa IDH1 mutant cells kung saan ang glutamine ay ginagamit para sa 2-hydroxyglutarate production.Immortalized normal human astrocytes engineered to express heterozygous mutant IDH1 o wild-type IDH1 ay inimbestigahan.Ang flux ng pyruvate sa pamamagitan ng PC at sa pamamagitan ng pyruvate dehydrogenase (PDH) ay natukoy sa pamamagitan ng paggamit ng magnetic resonance spectroscopy upang suriin ang pag-label ng [2-¹³C]glucose-derived ¹³C-labe led glutamate at glutamine.Ang mga assay ng aktibidad, RT-PCR at western blotting ay ginamit upang suriin ang pagpapahayag at aktibidad ng mga nauugnay na enzyme.Sinuri ang data ng Cancer Genome Atlas (TCGA) upang masuri ang pagpapahayag ng mga enzyme sa mga sample ng glioma ng tao. Kung ikukumpara sa mga wild-type na cell, ang mga mutant na IDH1 na cell ay makabuluhang nadagdagan ang fractional flux sa pamamagitan ng PC.Ito ay nauugnay sa isang makabuluhang pagtaas sa aktibidad at pagpapahayag ng PC.Kasabay nito, ang aktibidad ng PDH ay makabuluhang nabawasan, malamang na pinamagitan ng makabuluhang pagtaas ng inhibitory PDH phosphorylation ng PDH kinase 3. Alinsunod sa obserbasyon sa mga cell, ang pagsusuri ng data ng TCGA ay nagpahiwatig ng isang makabuluhang pagtaas sa expression ng PC sa mutant IDH-expressing human glioma samples kumpara sa wild- uri ng IDH. Iminumungkahi ng aming mga natuklasan na ang mga pagbabago sa PC at PDH ay maaaring isang mahalagang bahagi ng cellular adaptation sa mutation ng IDH1 at maaaring magsilbing mga potensyal na therapeutic target.