Mga produkto

Katulad ng iba pang positive-strand RNA virus, ang mga tombusvirus ay ginagaya ng membrane-bound viral replicase complex (VRC).Ang VRC ay binubuo ng p92 virus-coded RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), ang viral p33 RNA chaperone, at ilang co-opted na host protein.Upang maging isang functional na RdRp pagkatapos ng pagsasalin nito, ang p92 replication protein ay dapat na isama sa VRC, na sinusundan ng pag-activate nito.Nauna naming ipinakita sa isang cell-free yeast extract-based assay na ang pag-activate ng Tomato bushy stunt virus (TBSV) RdRp ay nangangailangan ng isang soluble host factor(s).Sa artikulong ito, tinutukoy namin ang cellular heat shock protein 70 (Hsp70) bilang co-opted host factor na kinakailangan para sa pag-activate ng isang N-terminally truncated recombinant na TBSV RdRp.Bilang karagdagan, ang pagharang na nakabatay sa maliit na molekula ng pag-andar ng Hsp70 ay pumipigil sa synthesis ng RNA ng tombusvirus RdRp sa vitro.Bukod dito, ipinapakita namin na ang mga neutral na phospholipid, ibig sabihin, phosphatidylethanolamine (PE) at phosphatidylcholine (PC ), ay nagpapahusay sa pag-activate ng RdRp sa vitro.Sa kaibahan, ang phosphatidylglycerol (PG) ay nagpapakita ng isang malakas at nangingibabaw na epekto ng pagbawalan sa in vitro RdRp activation.Ipinakita rin namin na ang PE at PC ay nagpapasigla sa pakikipag-ugnayan ng RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA], habang pinipigilan ng PG ang pagbubuklod ng viral RNA sa RdRp.Batay sa stimulatory versus inhibitory roles ng iba't ibang phospholipids sa tombusvirus RdRp activation, iminumungkahi namin na ang lipid composition ng mga target na subcellular membrane ay maaaring gamitin ng mga tombusvirus upang i-regulate ang bagong VRC assembly sa panahon ng impeksyon. Ang virus-coded RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), na responsable para sa pag-synthesize ng viral RNA progeny sa mga nahawaang cell ng ilang positive-strand RNA virus, ay hindi aktibo sa simula.Ang diskarte na ito ay malamang na maiwasan ang viral RNA synthesis sa cytosol na mabilis na hahantong sa induction ng RNA-triggered cellular antiviral na mga tugon.Sa panahon ng pagpupulong ng membrane-bound replicase complex, ang viral RdRp ay nagiging aktibo sa pamamagitan ng isang hindi kumpletong naiintindihan na proseso na ginagawang RdRp na may kakayahang RNA synthesis.Sa pamamagitan ng paggamit ng TBSV RdRp, ipinapakita namin na ang co-opted na cellular Hsp70 chaperone at neutral phospholipids ay nagpapadali sa pag-activate ng RdRp sa vitro.Sa kaibahan, ang phosphatidylglycerol (PG) ay may nangingibabaw na epekto sa pagbabawal sa in vitro RdRp activation at RdRp-viral RNA na pakikipag-ugnayan, na nagmumungkahi na ang membranous microdomain na nakapalibot sa RdRp ay lubos na nakakaapekto sa kakayahan nito para sa RNA synthesis.Kaya, ang pag-activate ng viral RdRp ay malamang na nakasalalay sa maraming bahagi ng host sa mga nahawaang cell.